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现有冻存方法存在的问题：
1、DMSO对细胞存在一定的毒性，用量受到限制，降低或者不使用DMSO，寻找其它替代物是最好的选择。
2、血清，即使是纯化得到的白蛋白，由于其动物来源的特性，会极大增加带来病毒等感染物质的可能。而且，血清来源受限，价格昂贵，所以其使用也必然会受到越来越多的限制。因此，寻找替代血清的非渗透性保护剂也显得尤为必要。
3、目前，最成熟和最稳定的冻存细胞技术是将加有保护剂的细胞悬液置于-196℃液氮中，这样可以使细胞暂时脱离生长状态而保持细胞的特性，在需要的时候经过复苏程序，使得细胞重新生长增殖以用于实验。细胞储存在-196℃液氮中，理论上储存时间是无限的，但是液氮冻存步骤繁琐，需要经过程序降温，如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟，然后移至-20℃冰箱30分钟，再移至-80℃冰箱保存16-18个小时（或隔夜），最后才移至液氮罐中进行长期的储存。（其中需要注意的是-20℃条件下不可超过1个小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量的死亡。）

pg电子官方网站科学家团队在细胞冻存领域进行了大量研究工作，分别于2015年研发了 “Cellregen无血清细胞冻存液”（货号：CF0101） 和2020年研发了 “无血清低DMSO细胞冻存液”（货号：CF0201；专利申请号：202010307890.6）。这两款冻存液均是不含血清，含DMSO，非程序降温、可-80℃长期冷冻保存的通用型细胞冻存液 ，区别在于“Cellregen无血清细胞冻存液”（货号：CF0101）的DMSO含量为10%， “无血清低DMSO细胞冻存液”（货号：CF0201）DMSO的含量为5%，产品均获得了广大科研工作者的喜爱。

鉴于某些类型的细胞对DMSO敏感，使用含DMSO的细胞冻存液可能会影响细胞的功能，pg电子官方网站继续研究工作，开发出一款无血清、无DMSO、无毒性、非程序降温、-80℃可长期冷冻保存的冻存液体系：CRD0无血清无DMSO细胞冻存液（货号：CF0301）。

产品特点：

☆  高安全性，不含血清及动物源成分，病毒、霉菌和支原体等污染可能性低，各批产品之间有更高的产品质量一致性。

☆  无DMSO，对细胞无潜在的毒性作用。

☆  细胞存活率高，无批次差异。

☆  完全冻存液配方，可直接使用，方便简捷。

☆  可直接存放于-80℃冰箱冻存，无需经过费时的程序降温过程（省时、省力、省钱），不需要采用程序降温仪，更不需要放置在-196℃液氮。

☆  可原位冻存，比如杂交瘤细胞的亚克隆，可以大规模减少工作量，避免污染。

CRD0无血清无DMSO细胞冻存液冻存效果：
 

        图1. 3T3细胞复苏后细胞状态图                  图2. ATDC5细胞复苏后细胞状态图

               3T3细胞存活率>90%                                   ATDC5存活率>90%

                                       图3 小鼠脾脏T细胞复苏后细胞凋亡图                                                                     三个批次复苏率均>95%，且批次间冻存效果无明显差异