酵母表达系统是应用较广泛的真核表达系统,兼有原核和高等真核系统的优点,具有培养条件普通、生长繁殖较快、易操作等优点,具有一定的翻译后加工能力,收获的外源蛋白质具有一定程度上的折叠加工和糖基化修饰,性质更加稳定,既可胞内表达又可分泌表达,是较为理想的重组真核蛋白表达系统。常用的酵母表达系统主要有毕赤酵母和酿酒酵母两种。
毕赤酵母体系优势在于有特有的强诱导性启动子,表达水平高,发酵工艺成熟,有适合真核生物基因产物正确折叠的细胞内环境和糖链加工系统,蛋白转录后糖基化所增加的寡糖链长度非常接近高等真核生物的结构,活性几率大大提高。酿酒酵母是GRAS生物,不产生毒素,已被美国FDA确认为安全性生物,酿酒酵母表达重组蛋白有时发生超糖基化,分泌效率相对较低,适用于有特殊要求的重组蛋白表达。公司技术团队具有丰富的酵母蛋白表达体系的宿主细胞资源和载体选择经验。
酵母表达系统的优势
多年酵母体系蛋白表达经验
十余种自主复制型和整合型载体
18种酵母专用启动子、6种酵母专用分泌信号肽可用于表达优化
毕赤酵母和酿酒酵母共十余种宿主菌可供选择
多种蛋白纯化技术
从基因设计到蛋白制备全流程服务
技术服务流程
详细信息 |
服务周期 |
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基因设计及合成 |
为客户提供密码子、GC含量和特殊基因序列的优化等基因设计工作,合成目的基因 |
2-3 周 |
构建表达质粒 |
将目的基因连接至表达载体,构建表达质粒 |
1-2 周 |
表达菌株建立 |
转化及菌株鉴定 |
1-2 周 |
初步表达测试及鉴定 |
评测初始表达水平并进行初步表达优化 |
1-2 周 |
表达体系优化 |
根据需要,针对测试结果和表达目标,对表达体系的组合进行系统性优化 |
3-4 周 |
放大培养 |
根据需要进行不同规模的放大培养发酵 |
1-2 周 |
蛋白纯化 |
采用多种纯化方法对目标蛋白进行纯化 |
1-2 周 |
蛋白鉴定 |
对蛋白进行SDS-PAGE、BCA蛋白浓度检测等方法检测 |
0.5 周 |
送货 |
提供项目COA、纯化蛋白 |
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