传统LB培养基是一种应用广泛和普通的细菌基础培养基,它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl,其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
pg电子官方网站推出一款液体、无菌、即用型大肠杆菌培养基——赛多培®增强型LB预混培养基!
赛多培®增强型LB预混培养基是在传统LB培养基的基础上改良而来,能够较传统LB培养基大大提高菌体密度。同时,可用作大肠杆菌的原核表达培养基(注:需添加诱导剂),可以提高目的蛋白表达量数倍。
使用赛多培®增强型LB预混培养基进行大肠杆菌培养时,操作流程与传统LB培养基使用方法一致。
应用案例
1. 大肠杆菌DH5α培养对比结果
以1: 1000比例转种过夜活化菌至新鲜培养基,37°C,180rpm培养:
2. 大肠杆菌BL21(DE3)培养对比结果
以含有质粒pET21a-O的BL21(DE3)为测试菌种(该菌种表达蛋白O)。以1: 1000比例转种过夜活化菌至新鲜培养基(含相应抗生素),37°C,180rpm培养:
3. 大肠杆菌BL21(DE3)/pET21a-O诱导表达培养对比结果
以含有质粒pET21a-O的BL21(DE3)为测试菌种(该菌种表达蛋白O)。以1: 1000比例转种过夜活化菌至新鲜培养基(含相应抗生素),37°C,180rpm培养,至OD600=1时,加入IPTG(终浓度1mM)诱导表达外源蛋白,继续37°C培养:
结论:在本次培养基和诱导表达条件下,O蛋白在赛多培®增强型LB预混培养基中的表达总量明显高于传统LB培养基。
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赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基,已获多家客户大规模使用验证。
不用添加IPTG诱导剂,不用监测OD值,培养过夜,轻松收菌,获得的菌量和蛋白表达量提高数倍。摇瓶和发酵罐均可用。
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